A biokémiai és biológiai rendszerekben a különböző molekulák között létrejövő kölcsönhatások mérésénél egyre inkább háttérbe szorulnak a molekulák jelölésén alapuló technikák. A jelölésmentes vizsgálati módszerek között előkelő helyet foglal el a felületi plazmon rezonancia (surface plasmon resonance) jelenség mérésén alapuló, a felületek közelében létrejövő kölcsönhatások vizsgálatára alkalmas módszer. Segítségével nem csak végpontot lehet jelezni, hanem a kölcsönhatás létrejöttének teljes folyamatát nyomon lehet követni. A mérések folyamán a kölcsönhatásba lépő molekulák alkalmasan megválasztott tagját egy 50 nm vastag aranyfelülethez rögzítjük, miközben a vele kölcsönhatásba lépő párját felette áramoltatjuk. A mérőhely karcálló zafír prizmán helyezkedik el, melynek hőmérséklete szabályozható. A másik odalról monokromatikus fénnyel megvilágított aranyfelület felett létrejövő kölcsönhatások befolyásolják a különböző szögek alatt visszaverődő fénysugarak intenzitását, melyekből következtetni lehet a kölcsönhatások létrejöttére és erősségére. Az eredmények kiértekélése és a kinetikai számítások elvégzése a TraceDrawer programmal történhet, mely kiszámítja a kölcsönhatásokra jellemző sebességi állandókat, elvégzi a Reichert SPR szoftverek mérési adatainak feldolgozását és jegyzőkönyvet készít az adatok grafikus megjelenítésével. A módszer kiválóan alkalmazható antitest – antigén, fehérje – fehérje, receptor – ligand, fehérje – DNS, fehérje – vírus, fehérje – sejt kölcsönhatás vizsgálatára.
A moduláris felépítésű Reichert kétcsatornás, felületi plazmon rezonancia (SPR) mérő készülékegyüttes része az:
- SR7500DC modul, mely tartalmazza a méréshez szükséges optikai és elektronikai komponenseket.
- SR8500 fecskendőpumpa a mintafelvitel és a folyamatos áramlás biztosításához. Kis mennyiségű minta esetén lehetőség van a pumpával az átfolyócellában a folyadék oda-vissza mozgatására.
- SR8600 számítógép vezérelt váltószelep, mellyel az SR7500DC készülék sorban kötött átfolyócellái közül lehet választani, hogy a folyadék csak az egyiken vagy mindkettőn haladjon át.
- SR8300 számítógép vezérelt félautomata injektor, manuálisan feltölthető, cserélhető mintahurokkal.
- SR8100 automata mintaadagoló 4oC-ig hűthető mintatérrel, biokompatibilis PEEK csövezéssel, injektálási lehetőség 96 és 384 helyes mikroplateből, 1,5 és 10 ml-es vialból.
- Vezérlő szoftver az asszociációs, egyensúlyi és disszociációs lépések programozott végrehajtásához
Specifikációk:
- fényforrás: 780 nm-es LED mátrix fénye integrálógömbbe vezetve a nagyintenzitású homogén térbeli eloszlás biztosítására
- mérőhely: 2-csatornás átfolyócella, megvilágítási felület: 4,5 mm2
- termosztálás: 4°C – 70°C (max 10°C szobahőmérséklet alatt)
- detektálás: 2 db 1024 pixeles extrém érzékenységű fotodiódasor
- refraktív index felbontás: <1×10-7 RIU
- refraktív index tartomány: 1,33 – 1,40
- koncentrációtartomány: 1 mM – 1 pM
- minimális detektálható molekulatömeg: 100 Dalton
- folyadékutak: HPLC csövezés, könnyen cserélhető
- mintaadagolás:
- 2 db 96 helyes mikroplate
- 2 db 384 helyes mikroplate
- 2 db 48 helyes HPLC (1,5ml) vial tartó
- adagolt mintamennyiség: mintaadagoló huroktól (loop) függően: 1 μl – 4500 μl
A 4SPR elnevezésű rendszer a legfiatalabb a Reichert cég felületi plazmon rezonancia (SPR) készülékeinek a sorában. A fejlett négycsatornás rendszer a kétcsatornás készülékekhez képest háromszor nagyobb hatékonysággal tud működni, ugyanakkor ugyanolyan megbízható pontosságot és rugalmasságot tud biztosítani, mint az SR7500DC készülék. A 4 csatorna használható 3 minta és 1 referencia vagy 2 minta és 2 referencia csatornaként is. A rendszer tartalmazza az optikai detektort, a négycsatornás termosztálható mérőcellát, a folyadékáramoltatáshoz szükséges pumpát, a gáztalanítót és a termosztált mintaterű automata mintaadagolót. A rendszer vezérlését a Reichert4SPR szoftver biztosítja, mely modern felhasználói környezetben teszi lehetővé a kísérletek egyszerű, de hatékony megtervezését és kivitelezését.
Specifikációk:
- fényforrás: 780 nm-es LED mátrix fénye integrálógömbbe vezetve a nagyintenzitású homogén térbeli eloszlás biztosítására
- mérőhely: 4 csatornás átfolyócella
- termosztálás: 4°C – 70°C (max 10°C szobahőmérséklet alatt)
- detektálás: 2D CCD érzékelő
- refraktív index felbontás: <1×10-7 RIU
- refraktív index tartomány: 1,33 – 1,40
- koncentrációtartomány: 1 mM – 1 pM
- minimális detektálható molekula tömeg: <100 Dalton
- folyadékutak: HPLC csövezés, könnyen cserélhető
- mintaadagolás:
- 2 db 96 helyes mikroplate
- 2 db 384 helyes mikroplate
- 2 db 48 helyes HPLC (1,5ml) vial tartó
- adagolt mintamennyiség: mintaadagoló huroktól (loop) függően: 1 μl – 4500 μl
- E-SPR mérőcella szimultán elektrokémiai és SPR mérésekhez
- kvarcablakos mérőcella fényindukált immobilizációs technikákhoz, fotopolimerizációhoz és optikai megfigyelésekhez
- aranyozott SPR szenzordiszk
- 10% mSAM (10% alkane thiol (PEG)6-COOH, 90% alkane thiol (PEG)3-OH) felületű SPR szenzordiszk
- ditiol SAM/COOH felületű SPR szenzordiszk
- Ni-NTA (nickel-nitrilotriacetic acid) felületű SPR szenzordiszk poly-His jelölt fehérjékhez
- hidrofób alkil felületű SPR szenzordiszk hidrofób pl. lipid molekulákhoz
- streptavidin felületű SPR szenzordiszk biotinnel jelölt molekulákhoz
- karboximetildextrán 200 nm vastag 3-D hidrogél felületű SPR szenzordiszk
- lineáris polikarboxilát 150 nm vastag 3-D hidrogél felületű SPR szenzordiszk